国产真实乱对白精彩久久_国产成人精品免费久久久久_精品无码一区二区三区爱欲_亚洲精品一区二区成人片

優化ELISA的重點之一在于洗滌。洗滌步驟可降低未結合抗體所引起的背景信號，從而增加分析的信噪比。高通量自動洗板機洗板人為因素少，速度快，條件恒定，但是使用高通量自動洗板機洗板時應注意以下三個關鍵點。

洗滌參數

主要的參數是洗(xi)(xi)(xi)滌(di)量。高通量自動洗(xi)(xi)(xi)板機會(hui)分(fen)配(pei)洗(xi)(xi)(xi)滌(di)液(ye)。如(ru)果(guo)你之前遭遇(yu)過高背(bei)景，那么(me)不要猶豫，將洗(xi)(xi)(xi)滌(di)量調(diao)為(wei)高，是比包被體積更高。太少的洗(xi)(xi)(xi)滌(di)液(ye)會(hui)讓(rang)一部分(fen)分(fen)析表面(mian)洗(xi)(xi)(xi)滌(di)不到(dao)，從而明顯(xian)增加背(bei)景。所有反應孔(kong)的洗(xi)(xi)(xi)滌(di)量必須相同(tong)。
ELISA試(shi)劑盒的使(shi)用手冊(ce)中列(lie)出(chu)包被量。建(jian)議(yi)使(shi)用350μl洗滌液進行洗滌，以(yi)便清潔整個反(fan)應(ying)孔的壁。一(yi)般(ban)來說，洗滌量越高，則孵育步驟殘留的抗體或抗原量就越少。

洗滌次數

影響洗滌(di)(di)效果的主要(yao)參數是(shi)洗滌(di)(di)循環的量。當然，洗滌(di)(di)次(ci)(ci)數越(yue)多，背(bei)景越(yue)低。然而，太多次(ci)(ci)的洗滌(di)(di)會降低信號強度，使其難以測定。通常的做法是(shi)在每次(ci)(ci)抗體或抗原(yuan)孵育(yu)后重復洗滌(di)(di)三次(ci)(ci)。不(bu)過，一般(ban)而言，包被(bei)平板需要(yao)的洗滌(di)(di)次(ci)(ci)數比用戶(hu)(hu)包被(bei)的平板要(yao)少。對于用戶(hu)(hu)包被(bei)的ELISA板，必須優化洗滌(di)(di)次(ci)(ci)數。

控制洗(xi)(xi)滌量(liang)和洗(xi)(xi)滌次數(shu)的(de)(de)另(ling)一(yi)種方法(fa)是(shi)(shi)加入過量(liang)的(de)(de)洗(xi)(xi)滌液。一(yi)般來說(shuo)，96孔板的(de)(de)每(mei)個(ge)孔能容納330至460 μl。不過，有些(xie)高通(tong)量(liang)自動洗(xi)(xi)板機可設置程序，分配遠遠超出(chu)這(zhe)(zhe)個(ge)量(liang)的(de)(de)洗(xi)(xi)滌液，比(bi)如(ru)1 ml。它是(shi)(shi)如(ru)何做到(dao)的(de)(de)呢？其(qi)實很簡單，就(jiu)是(shi)(shi)在分液的(de)(de)同時打開(kai)吸液功能。換句話說(shuo)，隨著分液器分配更多的(de)(de)液體，抽吸器也將(jiang)液體吸出(chu)。這(zhe)(zhe)種技術(shu)能增加洗(xi)(xi)滌量(liang)，但(dan)不會溢(yi)出(chu)到(dao)其(qi)他孔中。

抽吸

還有一些參數(shu)會(hui)影響洗滌步驟的效果。這(zhe)些參數(shu)包括(kuo)吸液高度和吸入位(wei)置，這(zhe)兩者都能調整，以降(jiang)低背景(jing)（殘留量）和差(cha)異。

殘留液體中包含未結合的抗(kang)原或(huo)抗(kang)體，它們會增加(jia)背景信號。殘留量越小(xiao)，殘留液體越少(shao)(shao)，轉(zhuan)移到下一步的干(gan)擾液體也就越少(shao)(shao)。

吸(xi)(xi)液高度會(hui)明顯影響殘(can)留(liu)量。如果洗滌(di)吸(xi)(xi)頭與反應孔(kong)底部的距離稍(shao)大，那就會(hui)讓殘(can)留(liu)量急劇增加(jia)。反之，如果洗滌(di)吸(xi)(xi)頭壓著反應孔(kong)底部，那么也會(hui)使吸(xi)(xi)液效率降低，殘(can)留(liu)量增加(jia)。

目前的(de)(de)高(gao)通(tong)量自(zi)動(dong)(dong)洗(xi)(xi)板機一般(ban)使(shi)用(yong)兩種(zhong)類型的(de)(de)洗(xi)(xi)頭(tou)：剛(gang)性(xing)和(he)浮(fu)動(dong)(dong)。浮(fu)動(dong)(dong)洗(xi)(xi)頭(tou)中(zhong)的(de)(de)吸頭(tou)可在(zai)洗(xi)(xi)滌過程中(zhong)自(zi)由上下(xia)移(yi)動(dong)(dong)，而剛(gang)性(xing)洗(xi)(xi)頭(tou)則固定在(zai)適當的(de)(de)位(wei)置。使(shi)用(yong)剛(gang)性(xing)洗(xi)(xi)頭(tou)的(de)(de)洗(xi)(xi)滌操作在(zai)優(you)化起來更為復雜，因為需要(yao)非常仔細(xi)地(di)調(diao)整(zheng)吸液高(gao)度(du)。如果實驗(yan)室使(shi)用(yong)幾種(zhong)不同的(de)(de)板，那可能會很(hen)(hen)耗時。在(zai)使(shi)用(yong)浮(fu)動(dong)(dong)洗(xi)(xi)頭(tou)時，吸頭(tou)會降到反應(ying)孔的(de)(de)底部。調(diao)整(zheng)高(gao)度(du)就不是很(hen)(hen)重(zhong)要(yao)，因此洗(xi)(xi)頭(tou)會下(xia)降到底部。

抽吸的位(wei)置(zhi)(zhi)也(ye)對殘留量有(you)著重(zhong)要影響(xiang)。如果每個孔(kong)只使用一個抽吸點（這很常(chang)見，因為(wei)更快），那么(me)抽吸的位(wei)置(zhi)(zhi)需(xu)要優化。位(wei)置(zhi)(zhi)取決于洗(xi)頭(tou)的性狀，但它(ta)幾乎不在反(fan)應(ying)孔(kong)的中(zhong)間(jian)(jian)，即使這是所有(you)洗(xi)頭(tou)常(chang)見的默認位(wei)置(zhi)(zhi)。一般來說，位(wei)置(zhi)(zhi)在孔(kong)中(zhong)間(jian)(jian)與孔(kong)壁之間(jian)(jian)的某處。

反應孔的形(xing)狀也(ye)會影響(xiang)殘留量。C形(xing)底(di)（平底(di)圓角(jiao)）的微(wei)孔板一般會比那些平底(di)尖角(jiao)的微(wei)孔板殘留量更低(di)。